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teknova培养基在优化过程中的设计步骤

2022-06-14      148
  培养基是指人工模拟细胞在体内生长的营养环境,供给微生物、植物或动物(或组织)生长繁殖的,由不同营养物质组合配制而成的营养基质,是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)、维生素和水等几大类物质。
  teknova培养基的澄清度应以便于轻松的观察到浑浊为宜、浓度应当遵循供应商建议的浓度、若无菌生产过程中使用了过滤器,能够通过生产过程同一级别的过滤器过滤为准,如需稀释过滤,培养基浓度应提供微生物生长能力验证;同时培养基料液应能满足全部覆盖生产设备。影响该培养基灭菌效果的因素除灭菌温度和时间外,还有培养基的成分和物理状态、PH、微生物数量、微生物细胞含水量、微生物细胞菌龄和耐热性、蒸汽中空气的排除情况、搅拌和泡沫等。
  teknova培养基的优化过程中,实验设计分为3个步骤:
  1.筛选,基于现有商业培养基进行筛选,以确定重要组分的群组以及初步优化,如使用简单的、以实验为依据的单次单因子方法解决复杂的优化。
  2.优化,基于DOE对已确定的重要组分进行进一步优化,主要优化基础培养基、补料培养基、一些添加物等,如使用响应曲面法找出多变量体系中的*条件。
  3.验证,对最终的培养基进行放大验证,分别用优化好的培养基与现用的或商业无血清的培养基培养细胞,比较各自的生长指标与抗体表达水平。
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